液相色譜儀(HPLC)作為現(xiàn)代分析化學(xué)中的重要設(shè)備,廣泛應(yīng)用于藥物分析、食品安全、環(huán)境監(jiān)測、生物化學(xué)等多個領(lǐng)域。為了確保儀器運行穩(wěn)定、數(shù)據(jù)準確可靠,在每次使用前做好充分的準備工作至關(guān)重要。那么,
液相色譜儀在使用前需要做哪些準備呢?
首先,操作人員應(yīng)熟悉儀器的操作規(guī)程和相關(guān)實驗方法,了解所用色譜柱的類型、流動相的配比以及檢測器的參數(shù)設(shè)置。同時,檢查實驗所需的試劑、溶劑是否齊全,并確保其純度符合要求,避免雜質(zhì)干擾分析結(jié)果。
其次,應(yīng)對液相色譜系統(tǒng)進行基本檢查。包括:確認泵的壓力傳感器、流路連接無泄漏;檢查脫氣機是否正常工作,以防止氣泡進入系統(tǒng)影響泵的穩(wěn)定性;查看色譜柱是否安裝正確,是否有堵塞或漏液現(xiàn)象;確認檢測器燈源是否點亮,基線是否穩(wěn)定等。
接下來是流動相的準備。流動相應(yīng)使用HPLC級溶劑,并經(jīng)過0.45μm或更細孔徑的濾膜過濾,去除微粒雜質(zhì)。同時,流動相應(yīng)進行超聲脫氣或在線脫氣處理,以減少氣泡對流速和檢測信號的影響。不同實驗所需的流動相比例應(yīng)提前配置好,并根據(jù)需要調(diào)節(jié)pH值或添加緩沖鹽。
樣品的預(yù)處理同樣不可忽視。樣品溶液應(yīng)經(jīng)過適當(dāng)?shù)倪^濾(如使用一次性濾頭)和稀釋,避免顆粒物進入色譜柱造成堵塞或損傷固定相。對于復(fù)雜基質(zhì)樣品,還應(yīng)考慮采用固相萃取(SPE)等凈化手段,以減少對色譜系統(tǒng)的污染。
此外,開機前應(yīng)開啟排液閥進行“purge”操作,排出泵內(nèi)可能存在的氣泡,確保系統(tǒng)壓力穩(wěn)定。然后關(guān)閉排液閥,設(shè)定合適的流速和檢測波長,待基線穩(wěn)定后再開始進樣分析。
而且,實驗室環(huán)境也需符合要求,保持恒定的溫度和濕度,避免震動和灰塵影響儀器性能。同時,應(yīng)建立完整的使用記錄和維護計劃,定期清洗流路、更換密封圈等易損件,確保儀器長期處于良好狀態(tài)。

總之,液相色譜儀在使用前的準備工作雖然繁瑣,但每一步都直接影響到分析結(jié)果的準確性與重復(fù)性。只有認真細致地完成各項準備,才能充分發(fā)揮儀器的性能,為科研和生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。